PHƯƠNG PHÁP XÉT NGHIỆM NHANH
BỆNH DISTEMPER TRÊN CHÓ
(Canine Distemper Virus One-step Test Kit)
A./ Nguyên lý:
- Phương pháp: Dùng phương pháp xét nghiệm ELISA để phát hiện kháng nguyên (KN) của virus Distemper trong máu, dịch kết mạc mắt và nước mũi của chó [the antigens of canine distemper viruses in canine blood, conjuntiva and snivel].
- Nguyên lý: Hai kháng thể (KT) đơn dòng [monoclonal antibodies] trong thiết bị kết hợp đặc thù với các khu quyết định kháng nguyên khác nhau [different epitopes of the antigens] của kháng nguyên cần chẩn đoán. Sau khi cho bệnh phẩm thấm vào vị trí đệm cellulôz [the cellulose pad] của thiết bị, các kháng nguyên của virus distemper sẽ di chuyển và kết hợp với hợp chất thể keo màu vàng chứa kháng thể đơn dòng ‘conjugat’ kháng distemper [gold-colloid complex of monoclonal anti-canine distemper virus of the conjugate pad], để tạo thành hợp chất ‘KT-KN’ [‘Ab-Ag’ complex]. Sau đó, phức hợp này kết hợp với kháng thể đơn dòng kháng distemper khác trong màng nitơ-cellulôz của thiết bi [the antibody of another monoclonal anti-canine distemper virus in the nitro-cellulose membrane], để tạo thành hợp chất kẹp hoàn chỉnh ‘KT-KN-KT’ [‘Ab-Ag-Ab’ direct sandwich].
- Đọc kết quả: Kết quả xét nghiệm có thể được biểu lộ qua sự xuất hiện các vạch C và T do thiết bị sử dụng ‘phép sắc ký miễn dịch’ .
B./ Đặc tính:
- Xét nghiệm nhanh chỉ một giai đoạn để phát hiện kháng nguyên của virus distemper trên chó.
- Với bệnh phẩm huyết tương và huyết thanh, bệnh được phát hiện hiệu quả ở giai đoạn đầu của bệnh [Effective detection of early infection with plasma and serum].
- Xét nghiệm dễ dàng với nhiều loại mẫu bệnh phẩm [Easy examination with various samples].
- Kết quả xét nghiệm nhanh trong vòng 5-10 phút.
- Không cần sử dụng thiết bị đắt tiền [Expensive equipment not required].
- Dễ dự trữ và bảo quản.
- Các nguyên liệu xét nghiệm có độ tinh khiết và chất lượng cao, làm tăng độ nhạy và độ đặc hiệu của thiết bị [its sensitivity and specificity].
C./ Vật liệu: 10 test /hộp
- Thiết bị xét nghiệm [Test] 10 đơn vị
- Chất pha loãng [Diluent] (dung dịch đệm) 0,25ml x 10 đơn vị
- Ống nhỏ giọt [Disposable droppers] 10 đơn vị
- Que lấy bệnh phẩm [Swabs for sample collection] 10 đơn vị
D./ Thành phần:
Thiết bị xét nghiệm có đánh dấu vùng S (vị trí nhỏ giọt), vạch kết quả xét nghiệm T [Test line] và vạch chứng C [Control test]. Thiết bị này gồm các thành phần như chất đệm mẫu [sample pad], chất đệm conjugat [conjugate pad], màng nitơ-cellulôz (giấy xét nghiệm [test paper]) và chất đệm hấp thu [absorbant pad].
E./ Tác dụng: Phát hiện kháng nguyên virus distemper trên chó từ các mẫu huyết tương, huyết thanh, dịch kết mạc mắt và nước mũi.
F./ Cách sử dụng:
1- Mẫu xét nghiệm [Specimen]: Huyết tương, huyết thanh, dịch kết mạc mắt và nước mũi.
2- Cách lấy và bảo quản mẫu bệnh phẩm:
- Mẫu bệnh phẩm: 80 micro-lít (3-4 giọt) huyết tương và huyết thanh, hay 100 micro-lít (3-4 giọt) dịch kết mạc mắt và nước mũi.
- Bảo quản mẫu ở 2-80 C trong vòng 7 ngày. Để dự trữ mẫu lâu hơn, huyết tương hay huyết thanh phải được tách ra từ máu [plasma or serum should be separated from the blood] và bảo quản ở - 250 C. Tuy nhiên, không được sử dụng máu toàn phần [do not use whole blood].
- Giữ mẫu ở nhiệt độ 22-250 C trước khi sử dụng.
3- Thao tác xét nghiệm:
a/. Mẫu huyết tương và huyết thanh:
- Nhỏ 3-4 giọt huyết thanh hay huyết tương lên thiết bị xét nghiệm [Drop 3-4 drops of serum or plasma onto the device].
- Đọc kết quả xét nghiệm trong vòng 5-10 phút.
b/. Dịch kết mạc mắt và nước mũi:
- Lấy mẫu nước mắt (hay dịch nhày mắt), hoặc dịch mũi bằng que lấy bệnh phẩm [Use swab to collect canine tears (or eye mucus), or snivel] và đưa mẫu bệnh phẩm vào ống chứa 0,25ml chất pha loãng.
- Khuấy động xoay tròn que trong chất pha loãng [Swirl the diluent with the swab].
- Nhỏ 3-4 giọt trên thiết bị xét nghiệm.
- Đọc kết quả xét nghiệm trong vòng 5-10 phút.
4- Giải thích kết quả xét nghiệm:
Vệt màu đỏ tía sẽ xuất hiện trên vạch chứng C không liên quan đến kết quả xét nghiệm [Purple band should appear on the control line regardless of the test result]. Sự hiện diện của vệt khác trên vạch mẫu T xác định kết quả xét nghiệm.
Vạch chứng C: Vạch này sẽ luôn luôn xuất hiện bất kể có sự hiện diện hay không của kháng nguyên virus distemper [regardless of the presence of the antigens of canine distemper virus]. Nếu vạch này không xuất hiện, test xem như không có giá trị; có thể do chất pha loãng không tinh khiết [impure buffer] và thiếu mẫu xét nghiệm [the lack of specimen]. Cần làm lại với chất pha loãng mới [It should be tested again with new buffer].
Vạch mẫu T: xác định sự hiện diện của kháng nguyên virus distemper :
- Âm tính: Chỉ xuất hiện vạch chứng C.
- Dương tính: Xuất hiện cả vạch mẫu T và vạch chứng C.
- Làm lại xét nghiệm khi:
+ Cả hai vạch mẫu T và vạch chứng C đều không xuất hiện.
+ Chỉ có vạch mẫu T xuất hiện.
5- Xác định kết quả:
Test này có giá trị bước đầu [This test is for primary screening]. Cần tham khảo ý kiến thú-y-sĩ để làm thêm các xét nghiệm cần thiết khác [Consult veterinarians for further necessary examinations] nhằm kiểm chứng chính xác kết quả.
G./ Lưu ý:
1- Chỉ sử dụng với mục đích chẩn đoán In-vitro trên chó.
2- Sử dụng trong vòng 10 phút sau khi tháo bỏ bao chứa [after opening the pouch] vì kit xét nghiệm rất nhạy cảm với ẩm độ và hiệu lực có thể sút giảm.
3- Cần thận trọng không được chạm vào ‘cửa sổ kết quả’ [Be careful of not touching ‘the result window’].
4- Phải sử dụng các ống nhỏ giọt khác nhau cho mỗi mẫu xét nghiệm (0,1ml) [Every specimen (0.1ml) should be used with different droppers].
5- Chỉ sử dụng chất pha loãng riêng cho từng loại xét nghiệm [For testing, buffer included only should be used].
6- Không được sử dụng các mẫu bị dung huyết hay bị nhiễm vi khuẩn, do có thể gây ra dương tính giả hay âm tính giả [it may turn out pseudo-positve or negative].
7- Cần sử lý mẫu xét nghiệm cẩn thận nhằm có thể tránh vấy nhiễm virus lạ và các vi khuẩn lây nhiễm [Manage specimen carefully, it can deliver unknown virus or infectious bacteria].
8- Khi mẫu xét nghiệm có khả năng gây nhiễm, cần sử dụng bao tay chỉ dùng một lần [Use disposable gloves when the infection of specimen is a possibility].
9- Tiệt trùng các chất thải rắn ở nhiệt độ 121o C trên 1 giờ trước khi loại thải [Dispose solid wastes after sterilizing them at 121o C for over 1 hour].
10- Không được sử dụng thiết bị xét nghiệm khi bao chứa bị rách, đóng gói không đúng qui cách và hết hạn sử dụng [Do not use when the pouch is torn, sealing is not good and expiration date passes].
G./ Cách bảo quản và hạn sử dụng:
Các kit xét nghiệm bảo quản ở nhiệt độ 2- 30o C có thể sủ dụng trong thời gian 15 tháng sau ngày sản xuất. Không được trữ ở nhiệt độ lạnh đông.
Nếu bảo quản trong tủ lạnh, khi sử dụng, phải để thiết bị xét nghiệm ở nhiệt độ phòng trong thời gian 15-30 phút trước khi tiến hành xét nghiệm
G./ Trường hợp đổi sản phẩm xét nghiệm:
Các kit xét nghiệm được sản xuất theo hệ thống kiểm soát chất lượng chặt chẽ. Tuy nhiên, nếu sản phẩm này bị hư hỏng trong quá trình chuyển giao hàng hay hết thời hạn sử dụng, cần đề nghị nhà phân phối đổi sản phẩm khác.
(Theo tài liệu EZ capture ‘Canine Distemper Virus One-step Test Kit’)
Bài này được download từ chi cục thú y TP.Hồ Chí Minh.
Mình không biết ở Hà Nội đã có nơi nào có kĩ thuật chẩn đoán này chưa? Bạn nào biết thì cho mình biết địa chỉ với nhé!
BỆNH DISTEMPER TRÊN CHÓ
(Canine Distemper Virus One-step Test Kit)
A./ Nguyên lý:
- Phương pháp: Dùng phương pháp xét nghiệm ELISA để phát hiện kháng nguyên (KN) của virus Distemper trong máu, dịch kết mạc mắt và nước mũi của chó [the antigens of canine distemper viruses in canine blood, conjuntiva and snivel].
- Nguyên lý: Hai kháng thể (KT) đơn dòng [monoclonal antibodies] trong thiết bị kết hợp đặc thù với các khu quyết định kháng nguyên khác nhau [different epitopes of the antigens] của kháng nguyên cần chẩn đoán. Sau khi cho bệnh phẩm thấm vào vị trí đệm cellulôz [the cellulose pad] của thiết bị, các kháng nguyên của virus distemper sẽ di chuyển và kết hợp với hợp chất thể keo màu vàng chứa kháng thể đơn dòng ‘conjugat’ kháng distemper [gold-colloid complex of monoclonal anti-canine distemper virus of the conjugate pad], để tạo thành hợp chất ‘KT-KN’ [‘Ab-Ag’ complex]. Sau đó, phức hợp này kết hợp với kháng thể đơn dòng kháng distemper khác trong màng nitơ-cellulôz của thiết bi [the antibody of another monoclonal anti-canine distemper virus in the nitro-cellulose membrane], để tạo thành hợp chất kẹp hoàn chỉnh ‘KT-KN-KT’ [‘Ab-Ag-Ab’ direct sandwich].
- Đọc kết quả: Kết quả xét nghiệm có thể được biểu lộ qua sự xuất hiện các vạch C và T do thiết bị sử dụng ‘phép sắc ký miễn dịch’ .
B./ Đặc tính:
- Xét nghiệm nhanh chỉ một giai đoạn để phát hiện kháng nguyên của virus distemper trên chó.
- Với bệnh phẩm huyết tương và huyết thanh, bệnh được phát hiện hiệu quả ở giai đoạn đầu của bệnh [Effective detection of early infection with plasma and serum].
- Xét nghiệm dễ dàng với nhiều loại mẫu bệnh phẩm [Easy examination with various samples].
- Kết quả xét nghiệm nhanh trong vòng 5-10 phút.
- Không cần sử dụng thiết bị đắt tiền [Expensive equipment not required].
- Dễ dự trữ và bảo quản.
- Các nguyên liệu xét nghiệm có độ tinh khiết và chất lượng cao, làm tăng độ nhạy và độ đặc hiệu của thiết bị [its sensitivity and specificity].
C./ Vật liệu: 10 test /hộp
- Thiết bị xét nghiệm [Test] 10 đơn vị
- Chất pha loãng [Diluent] (dung dịch đệm) 0,25ml x 10 đơn vị
- Ống nhỏ giọt [Disposable droppers] 10 đơn vị
- Que lấy bệnh phẩm [Swabs for sample collection] 10 đơn vị
D./ Thành phần:
Thiết bị xét nghiệm có đánh dấu vùng S (vị trí nhỏ giọt), vạch kết quả xét nghiệm T [Test line] và vạch chứng C [Control test]. Thiết bị này gồm các thành phần như chất đệm mẫu [sample pad], chất đệm conjugat [conjugate pad], màng nitơ-cellulôz (giấy xét nghiệm [test paper]) và chất đệm hấp thu [absorbant pad].
E./ Tác dụng: Phát hiện kháng nguyên virus distemper trên chó từ các mẫu huyết tương, huyết thanh, dịch kết mạc mắt và nước mũi.
F./ Cách sử dụng:
1- Mẫu xét nghiệm [Specimen]: Huyết tương, huyết thanh, dịch kết mạc mắt và nước mũi.
2- Cách lấy và bảo quản mẫu bệnh phẩm:
- Mẫu bệnh phẩm: 80 micro-lít (3-4 giọt) huyết tương và huyết thanh, hay 100 micro-lít (3-4 giọt) dịch kết mạc mắt và nước mũi.
- Bảo quản mẫu ở 2-80 C trong vòng 7 ngày. Để dự trữ mẫu lâu hơn, huyết tương hay huyết thanh phải được tách ra từ máu [plasma or serum should be separated from the blood] và bảo quản ở - 250 C. Tuy nhiên, không được sử dụng máu toàn phần [do not use whole blood].
- Giữ mẫu ở nhiệt độ 22-250 C trước khi sử dụng.
3- Thao tác xét nghiệm:
a/. Mẫu huyết tương và huyết thanh:
- Nhỏ 3-4 giọt huyết thanh hay huyết tương lên thiết bị xét nghiệm [Drop 3-4 drops of serum or plasma onto the device].
- Đọc kết quả xét nghiệm trong vòng 5-10 phút.
b/. Dịch kết mạc mắt và nước mũi:
- Lấy mẫu nước mắt (hay dịch nhày mắt), hoặc dịch mũi bằng que lấy bệnh phẩm [Use swab to collect canine tears (or eye mucus), or snivel] và đưa mẫu bệnh phẩm vào ống chứa 0,25ml chất pha loãng.
- Khuấy động xoay tròn que trong chất pha loãng [Swirl the diluent with the swab].
- Nhỏ 3-4 giọt trên thiết bị xét nghiệm.
- Đọc kết quả xét nghiệm trong vòng 5-10 phút.
4- Giải thích kết quả xét nghiệm:
Vệt màu đỏ tía sẽ xuất hiện trên vạch chứng C không liên quan đến kết quả xét nghiệm [Purple band should appear on the control line regardless of the test result]. Sự hiện diện của vệt khác trên vạch mẫu T xác định kết quả xét nghiệm.
Vạch chứng C: Vạch này sẽ luôn luôn xuất hiện bất kể có sự hiện diện hay không của kháng nguyên virus distemper [regardless of the presence of the antigens of canine distemper virus]. Nếu vạch này không xuất hiện, test xem như không có giá trị; có thể do chất pha loãng không tinh khiết [impure buffer] và thiếu mẫu xét nghiệm [the lack of specimen]. Cần làm lại với chất pha loãng mới [It should be tested again with new buffer].
Vạch mẫu T: xác định sự hiện diện của kháng nguyên virus distemper :
- Âm tính: Chỉ xuất hiện vạch chứng C.
- Dương tính: Xuất hiện cả vạch mẫu T và vạch chứng C.
- Làm lại xét nghiệm khi:
+ Cả hai vạch mẫu T và vạch chứng C đều không xuất hiện.
+ Chỉ có vạch mẫu T xuất hiện.
5- Xác định kết quả:
Test này có giá trị bước đầu [This test is for primary screening]. Cần tham khảo ý kiến thú-y-sĩ để làm thêm các xét nghiệm cần thiết khác [Consult veterinarians for further necessary examinations] nhằm kiểm chứng chính xác kết quả.
G./ Lưu ý:
1- Chỉ sử dụng với mục đích chẩn đoán In-vitro trên chó.
2- Sử dụng trong vòng 10 phút sau khi tháo bỏ bao chứa [after opening the pouch] vì kit xét nghiệm rất nhạy cảm với ẩm độ và hiệu lực có thể sút giảm.
3- Cần thận trọng không được chạm vào ‘cửa sổ kết quả’ [Be careful of not touching ‘the result window’].
4- Phải sử dụng các ống nhỏ giọt khác nhau cho mỗi mẫu xét nghiệm (0,1ml) [Every specimen (0.1ml) should be used with different droppers].
5- Chỉ sử dụng chất pha loãng riêng cho từng loại xét nghiệm [For testing, buffer included only should be used].
6- Không được sử dụng các mẫu bị dung huyết hay bị nhiễm vi khuẩn, do có thể gây ra dương tính giả hay âm tính giả [it may turn out pseudo-positve or negative].
7- Cần sử lý mẫu xét nghiệm cẩn thận nhằm có thể tránh vấy nhiễm virus lạ và các vi khuẩn lây nhiễm [Manage specimen carefully, it can deliver unknown virus or infectious bacteria].
8- Khi mẫu xét nghiệm có khả năng gây nhiễm, cần sử dụng bao tay chỉ dùng một lần [Use disposable gloves when the infection of specimen is a possibility].
9- Tiệt trùng các chất thải rắn ở nhiệt độ 121o C trên 1 giờ trước khi loại thải [Dispose solid wastes after sterilizing them at 121o C for over 1 hour].
10- Không được sử dụng thiết bị xét nghiệm khi bao chứa bị rách, đóng gói không đúng qui cách và hết hạn sử dụng [Do not use when the pouch is torn, sealing is not good and expiration date passes].
G./ Cách bảo quản và hạn sử dụng:
Các kit xét nghiệm bảo quản ở nhiệt độ 2- 30o C có thể sủ dụng trong thời gian 15 tháng sau ngày sản xuất. Không được trữ ở nhiệt độ lạnh đông.
Nếu bảo quản trong tủ lạnh, khi sử dụng, phải để thiết bị xét nghiệm ở nhiệt độ phòng trong thời gian 15-30 phút trước khi tiến hành xét nghiệm
G./ Trường hợp đổi sản phẩm xét nghiệm:
Các kit xét nghiệm được sản xuất theo hệ thống kiểm soát chất lượng chặt chẽ. Tuy nhiên, nếu sản phẩm này bị hư hỏng trong quá trình chuyển giao hàng hay hết thời hạn sử dụng, cần đề nghị nhà phân phối đổi sản phẩm khác.
(Theo tài liệu EZ capture ‘Canine Distemper Virus One-step Test Kit’)
Bài này được download từ chi cục thú y TP.Hồ Chí Minh.
Mình không biết ở Hà Nội đã có nơi nào có kĩ thuật chẩn đoán này chưa? Bạn nào biết thì cho mình biết địa chỉ với nhé!